细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。
3D细胞培养:3D细胞培养是一种在人工创造的环境中生物细胞可以在所有三维空间中生长的技术,使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长,构成三维的细胞载体复合物,3D细胞培养允许细胞在体外向各个方向生长,类似于它们在体内的生长方式。3D培养技术既能保留体内细胞微环境的物质及结构基础,又能展现细胞培养的直观性及条件可控性的优势。
当细胞株遇上3D细胞培养技术又能擦出怎样的火花?
我们取AGS (人胃腺癌细胞)、MDAH-2774(人卵巢癌细胞)、SK-OV-3 (人卵巢癌细胞)、PANC-1 (人胰腺癌细胞)、Hep G2 (人肝癌细胞)五株细胞系分别做2D培养以及3D培养,看看究竟2D培养产物和3D培养产物有何不同。(做法可参考以下视频)
我们将2D培养好的5种细胞传代一部分使用2D培养,一部分使用CopGel 3D 细胞球培养水凝胶试剂盒(CR01A01-05/10),这样可以确保每种类型的细胞是由同一株细胞增殖得来的。同时我们测试了3D培养细胞活率,如下图所示:
图A:是五种类型的细胞株分别使用2D培养和3D培养的镜下图;
图B:是五种类型的细胞株在3D培养的条件下测的的细胞活率。
我们分别对五种类型的细胞株的2D培养产物和3D培养产物进行RT-PCR检测CD24、CD44、CD90、Oct-4 和 Nanoge的表达量,如下图所示:
白色柱状为2D培养物,黑色柱状为3D培养物
从结果上不难看出大部分3D培养的细胞株在表达量上都高过2D培养物。这也说明3D培养的细胞株比2D培养的细胞株更符合癌症干细胞的研究。
因此,做癌症干细胞(CSC)研究3D模型相比于2D模型效果更佳,除此之外做药物筛选实验,3D模型相比于2D模型效果也会更符合实际情况,这个我们放在下期讨论。